微柱分离激光检测器
为适应低浓度微量多组分样品的分离分析，以微柱液体色谱和毛细管电泳（capillary elcetrophoresis ,CE）技术为代表的微柱分离技术得到了迅速的发展。它不但是无机、有机及手性分子分离分析的有力工具，而且亦是氨基酸，多肤，蛋白质和核酸等生命分子分离分析的有力武器。在生化、食品、环境、药物、毒物等诸多领域得到迅速扩大的应用，成为分析化学和生物化学中最受瞩目、发展最快的新技术之一。NB!}+bql
微柱分离技术以高效，快速，样品用量少为特征。通常情况下，CE 的进样体积仅为nl级或更小，进样浓度在10-5mol/ L -x ^&\7H$J8l
以下，因此，非常需要一个高灵敏度的微体积检测器与之匹配。多年来，微柱分离检测方法和检测器的研究，一直是微柱分离技术中的热门课题，在所报道的文献中占有显著份量。至今，已研究和报道过的许多检测方法和检测器中，有不少是基于激光检测的，如LIF
, CBTL , RS 和激光折射等。研究结果表明，微柱液体色谱和毛细管电泳的高效分离与激光光谱的高灵敏度检测相结合是最理想的了。(bT s8Oo
前面已指出，LIF 和CBTL 技术有很高灵敏度，将它用于微柱分离在线检测，可以获得fmol 的质量检测限。例如，用LIF
法检测微柱色谱分离的邻苯二醛（OPA）和萘二醛( NDA）衍生的氨基酸，质量检测限分别为4～15fmol 和0.2～0.5fmol (Q&|M0R/Qr A
；检测CE p6Hv;fl1W&W*P
分离的四甲基罗丹明异硫氰酸盐染料，检测限为0.5zmol；用CBTL技术测定微柱色谱分离的DABSYL-氨基酸衍生物，检测限达0.75fmol，相当于在探测束体积内达到50
个分子的质量检测限；用激光光热偏转和CBTL 法检测CE 分离的DABSYL-和PTH-氨基酸，检测限均达到亚fmol 0j]b p3^ d.q9Ir![+T)b
级。由以上几例可见，激光光谱检测器达到了超高灵敏度水平，是任何其它检测器无法比拟的。正是由于激光光谱检测器的高灵敏度，CE 6a`P5DN9eoC
和微柱液体色谱技术才在氨基酸分析、肤谱分析、快速免疫分析等方面获得了很大成功，引起了广泛的关注，并迅速成为研究热点。值得强调指出的是，毛细管聚丙烯酞胺凝胶电泳一激光诱导荧光检测系统是DNA q2X3SJ([4MP
序列分析的优选方案，已被列入人类基因组计划（Human Genome Project）的首要课题。
在非荧光物质测定时，E . S . Yeung
发展了激光诱导间接荧光检测法，省去了样品衍生化，扩展了荧光检测的应用范围。间接法不要求待测组分具备光吸收或荧光特性，通用性强。在作者实验室，采用20mW 1z uE1g U~%N5A$c
He-Ne
激光（632.5nm）作泵浦束，亚甲蓝溶液为背景电解质溶液，间接光热测定毛细管电泳分离的未衍生的氨基酸，进样浓度可低至5×10-6mol/L
，优于间接UV 吸收法，与间接荧光法和间接电化学法相当。(h Nz3jZ
RS 0ze W U e sc
检测器虽然灵敏度不高，但它能得到分离组分的结构信息。如果采用灵敏度高的表面增强拉曼散射技术，这种能给出结构信息的在柱检测器将会受到人们的青睐。
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