薄层色谱法的具体操作步骤
薄层色谱法的操作过程是不连续的,每个步骤都有各自对应的设备。一般步骤如下:*Q[3h}e x1. 选择固定相x$RX4V.g8h
一般固定相或载体都是粒度较小,大小均匀的固体。常用的有硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素、离子交换纤维素、聚酰胺、葡聚糖凝化学键和固定相等。根据不同的待分离样品选择合适的载体。
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2. 制备薄板V0W T#~C)xz
薄板一般为玻璃板、塑料片或铝箔。为了将载体均匀的涂布在薄板上,一般使用涂布器。涂布器有手工、半自动或全自动等数种。
3. 点样
点样使用点样器,定性时可用普通毛细管,定量时应该用微量注射器或微量定量毛细管。@*Rn~N~"P
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4. 展开样品
根据薄层板的尺寸及展开方式的不同,可以选用不同规格及形式的展开室,常用不同尺寸的水平式及直立式两种玻璃展开室。
5. 斑点定位 r$BcV/r
展开后的薄层板上被分离的组分一般是不可见的,需要使用适当的方法使斑点显示并可见,通常使用以下几种方法来完成这一任务:光学检测法、蒸汽显色法、试剂显色法、生物自显影 ,T bw:` z"X}V
和放射自显影。
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6. 定性分析q@@T `1O0s+k`0{D)d
分离和定位完成后,可以根据斑点的位置、定位后的颜色等元素对组分进行定性的分析。2o\K`a{UI
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7. 定量扫描p;y,Je6T
用薄层扫描仪对斑点进行扫描,根据对斑点面积或扫描峰高的分析可以确定组分的含量。
光谱的选择
有色斑点是不是只用看它在可见光区的的吸收就可以了,不用考虑紫外区?请多多指教 谢谢cgL+s+_7Cg VB;R不过不是很好
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