Folin-酚试剂法测定蛋白质浓度
[font=宋体][size=12pt][b]原理[/b][/size][/font][font=宋体][size=12pt]蛋白质[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]([/font][/size][font=宋体][size=12pt]或多肽[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman])[/font][/size][font=宋体][size=12pt]分子中含有酪氮酸或色氨酸，能与[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]Folin-[/font][/size][font=宋体][size=12pt]酚试剂起氧化还原反应，生成蓝色化合物，蓝色的深浅与蛋白质浓度成正比，可作比色法测定。[/size][/font][b][font=宋体][size=12pt]试剂[/size][/font][/b][b][/b][size=12pt][font=Times New Roman]([/font][/size][font=宋体][size=12pt]一[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman])Folin-[/font][/size][font=宋体][size=12pt]酚试剂[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]A[/font][/size][font=宋体][size=12pt]：将[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]lgNazCO~[/font][/size][font=宋体][size=12pt]溶于[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]50m10[/font][/size][font=宋体][size=12pt]．[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]1NNaOH[/font][/size][font=宋体][size=12pt]溶液。另将[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]0[/font][/size][font=宋体][size=12pt]．[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]5CuS04[/font][/size][font=宋体][size=12pt]．[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]5H20[/font][/size][font=宋体][size=12pt]溶于[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]100ml1[/font][/size][font=宋体][size=12pt]％酒石酸钾[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]([/font][/size][font=宋体][size=12pt]或酒石酸钠[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman])[/font][/size][font=宋体][size=12pt]溶液。将前者[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]50mL[/font][/size][font=宋体][size=12pt]与硫酸铜一酒石酸钾溶液[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]lmL[/font][/size][font=宋体][size=12pt]混合。混合后的溶液一日内有效。[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]([/font][/size][font=宋体][size=12pt]二[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman])Folin-[/font][/size][font=宋体][size=12pt]酚试[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]B[/font][/size][font=宋体][size=12pt]：将[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]100g[/font][/size][font=宋体][size=12pt]钨酸钠[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman](Na2WO4?2H2O)[/font][/size][font=宋体][size=12pt]、[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]25g[/font][/size][font=宋体][size=12pt]钼酸钠[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman](Na2MO4[/font][/size][font=宋体][size=12pt]．[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]2H2O)[/font][/size][font=宋体][size=12pt]、[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]700mL[/font][/size][font=宋体][size=12pt]蒸馏水、[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]50moL85[/font][/size][font=宋体][size=12pt]％磷酸及[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]100ml[/font][/size][font=宋体][size=12pt]浓盐酸置于[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]1500mL[/font][/size][font=宋体][size=12pt]磨口圆底烧瓶中，充分混匀后，接上磨口冷凝管，回馏[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]10[/font][/size][font=宋体][size=12pt]小时。再加入硫酸锂[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]150g[/font][/size][font=宋体][size=12pt]，蒸馏水[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]50ml[/font][/size][font=宋体][size=12pt]及液溴数滴，开口煮沸[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]15[/font][/size][font=宋体][size=12pt]分钟，驱除过量的溴[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]([/font][/size][font=宋体][size=12pt]在通内橱内进行[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman])[/font][/size][font=宋体][size=12pt]。冷却，稀释至[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]1000ml[/font][/size][font=宋体][size=12pt]，过滤，滤液呈微绿色，贮于棕色瓶中。临用前用标准氢氧化钠溶液滴定，用酚酞作指示剂[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]([/font][/size][font=宋体][size=12pt]由于试剂微绿，影响滴定终点的观察，可将试剂稀释[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]100[/font][/size][font=宋体][size=12pt]倍再滴定[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman])[/font][/size][font=宋体][size=12pt]。根据滴定结果，将试剂稀释至相当于[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]1N[/font][/size][font=宋体][size=12pt]酸[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]([/font][/size][font=宋体][size=12pt]稀释[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman]1[/font][/size][font=宋体][size=12pt]倍左右[/size][/font][size=12pt][font=Times New Roman])[/font][/size][font=宋体][size=12pt]。[/size][/font] 自己顶下
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