化学发光检测
化学发光检测 化学反应过程中的能量以光的形式释放出来,成为化学发光,有些生物体在能量代谢的过程中通过消耗ATP也可发光,为生物发光。化学发光 常用物质包括二氧乙烷衍生物、鲁米诺及衍生物、和丫啶酯。这些试剂可用于各种标本分析、HPLC检测和流动注射分析系统。二氧乙烷衍生物在碱性磷酸酶的作用下水解,形成一种高能量的中间体,这种中间体进一步分解后释放出光子,此类有代表性的物质是AMPPD和CSPD。此方法最为广泛的应用是基于碱性磷酸酶和β半乳糖苷酶的分析系统。
碱性磷酸酶(AP)的测定 检测AP,β-葡糖苷酸酶活性的方法是使用一种有商品供应的稳定的1,2-二氧乙烷衍生物,这种发光底物的发光时间为数分钟至数小时。发光强度直接与酶的浓度相关。这种底物可用于1) 微孔板的免疫分析,DNA 探针捕获法和报告基因分析法, 2) 用于蛋白质和核酸分析的96-孔斑点膜。 8w9S'OBK8P0l/Is
鲁米诺 是一种最古老的和最常用的试剂,在碱性条件下可被过氧化物氧化,同时发光,鲁米诺和过氧化物之间的氧化还原反应需要催化剂,这种催化剂一般为多价金属离子、过氧化物酶如铁、辣根过氧化物酶等,此种方法常用于检测过氧化物、重金属、过氧化物酶的含量,以及由此衍生的检测自由基、进行毒物分析和基于过氧化物酶和葡萄糖氧化酶的分析方法。
丫啶酯及衍生物 在碱性条件下可产生瞬时发光,将其作为标记物,已广泛用于免疫分析和分子杂交。
Northern Blotting & Southern Blotting
◆RNADetectorTM Northern Blotting Kit
·只需10分钟的胶片曝光就可检测到50ng人总RNA
·节约样品用量;凝胶中只需1μg的RNA
·化学发光底物可持续发光5天 Yyb0JVUjQ1VO
·低背景;较之同类产品具有更高的信噪比 /snc4ZEs6[0rV1Pb
RNADetector 曝光10分钟 磷32曝光3.5小时用一个生物素标记的α肌动蛋白逆转录探针和RNADetector Northern Blotting 试剂盒(左图),或磷32标记的探针(1×106dpm/ml)(右图)检测Hela细胞的RNA
试剂盒包含所有的必需试剂(生物素标记的探针除外)
试剂盒组成:
·甲酰胺杂交缓冲液 !}z6K bkG
·阻断浓缩液
·阻断粉