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onizuka 发表于 2007-5-14 21:44

化学发光检测

·灵敏：KPL的Western Blot系统具有极高的的灵敏度和检出极限，可以检测到皮克级。
-x3y,^Jg~+O9` ·低背景：高质量的试剂保证实验结果的稳定和重复性，将背景干扰降至最小。J[Tk0C,N
·快速：LumiGLO Western Blot试剂盒最少可在1分钟内出结果。KPL的染色发光试剂盒可在10分钟之内出结果。
~E6W5M?:AmQ4r&K ·方便：所有必需的试剂全部包括，无须预先准备。
|$~%fI p ·LumiGLO系统的优点：LumiGLO化学发光底物提供了更高的灵敏度，而且使得胶片显影更持久。印迹可以被多次剥离重新用作探针。
1b/uHY]"A 使用带有HRP抗兔复合物的蛋白检测LumiGLO Western Blot试剂盒和一个兔抗α半乳糖苷得一抗检测大肠杆菌未成熟细胞过量表达α半乳糖苷胶片曝光10分钟
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Protein Detector Western Blot试剂盒包含所有的必需试剂（一抗除外）
/{:hD%QV2m)fi 试剂盒组成：
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_5n ·抗小鼠抗兔复合物'sp4A2o_!ns,s9Eq
·阻断液jK h/ZB)U
·洗脱液
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VyJ%j-Kyr ·化学发光或发色底物
c3Ah3]eR bC8E EM 目录号 产品说明 规格 价格（元） 54-12-50 Protein Detector LumiGLO Western Blot Kit 2500cm2 3100 55-11-50 Protein Detector BCIP/NBT Western Blot Kit 2500cm2 2800 54-11-50 Protein Detector TMP Western Blot Kit 2500cm2 2800 5\%m#O#N7XNqy a
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Lumi-Phos™ WB化学发光底物E8x(eBM ]SspW
·AP标记检测的化学发光底物
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`un*A ·高灵敏度，低背景2Pb^5[5Hz
近几年来，AP的研究者一直致力于提高WB的灵敏度、降低背景的研究。Pierce，一个化学发光性检测产品开发的佼佼者，推出了能满足这些需求的Lumi-Phos™ WB化学发光底物，克服了传统的各种AP化学发光底物的局限性。I4K2l M{&D
Lumi-Phos™ WB底物提供低皮克级的灵敏度，能检测到低至几个Attomoles的靶配体。Lumi-Phos™ 还产生比其它常用AP化学发光底物更低的干扰，提供更好的信噪比和更清晰的影象。信号是瞬时产生的，因而不再需要为了可测量的信号等待15到30分钟。所有这些优点与超低价格相结合，Pierce在化学发光检测领域又一次制定了一个新的行业标准。-^N'S(em1gg]w

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N+o'j:[ B/k%Dq?!WG Attomole级检测水平和透明似水晶的背景lC0k|T[q9b#T'd
系列梯度稀释的鼠IL-2重组蛋白经4％-20％SDS-PAGE凝胶电泳分离后，分离的蛋白质转印到硝化纤维素膜上封闭。膜和1／500（1ug/ml）稀释度的纯化大鼠抗小鼠IL-2抗体一起孵育，再经1／5,000(200ng/ml)稀释度的AP标记的山羊抗大鼠IgG孵育。洗涤后加入Lumi-Phos 橶B底物5分钟后经X胶片曝光
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9}{(Iiau 特 点
zH']u_3@K3Q'w 高灵敏度*fT7S\3g7I"H1f
低背景
b(G9M ]M.? ts 价格便宜A?)R,zq S
信号持续时间长R(T dy-Ny)q
瞬时强信号'm:b0@_,GVP
即用型VI;dY
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优 点3?`i Y] kw(Gw
能检测1.2pg 或﹥1attomoles的鼠IL-2
|-^4d'ur7W4zhb 高信噪比产生出更清晰的印迹影像8Fuf
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较Tropix CSPD® 或CDP-Star® 底物便宜（参1999U.S.价目表），而且不需要为了硝化纤维素膜再购买附加的显影增强剂rI%Zarg5v:a%t6Nk
可以重复印迹显影8B8e4Jj:O"_
不再需要等待15～30分钟直至初始信号变成可测的强烈信号Iq-`+UT[
使用这个成套系统不再需要自行配制试剂d
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目录号 产品说明 规格 价格（元） 34150 Lumi-Phos™ 化学发光底物 Kit 2550 'f'Z8v1wy:Q6M#\
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SuperSignal® WB化学发光底物;I7GeV;Jp7J
·比ECL系统更敏税
1eZ-R`4JWb k ·比ECL系统更便宜 jG_
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}V)Bud&s&X 化学发光底物用于免疫印迹技术已有十几年的历史，但是在1995年SuperSignal®WB化学发光底物还是开创了这类检测方法的新纪元。研究者若采用SuperSignal® 化学发光底物进行WB，可以节约更多的费用、抗体用量及时间，并产生高强度、长持续时间的信号。SuperSignal® WB化学发光底物还具有24小时的工作溶液稳定性以及一年的产品保存期的特性。p^_i$G6V w
第一代SuperSignal® WB化学发光底物即众所周知的SuperSignal® West Pico化学发光底物，就掀起了研究界的风暴。很快，越来越多的需求促使Pierce的研究者们开发一个与用于今天的成像设备的底物一样，但灵敏度更高的化学发光底物。Pierce的科学家们敢于迎接挑战，应用范围广泛的SuperSignal® WB化学发光底物终于产生了。
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$?F(cN*\yKw 什么样的底物适合于你？
,Uu#U#IaIjh#B   SuperSignal® West Pico化学发光底物 SuperSignal® West Femto超灵敏型底物 SuperSignal® West Femto增强型底物 主要优点 与ECL™ 系统相比减半的价格、双倍的信号 适用于HRP检测的最灵敏的化学发光底物 延长的信号持续时间使这种底物用于今天的成像设备最为理想 低检测极限 低皮克（10-12） 低飞克（10-15） 中飞克（10-14） 中attomole(10-17) 中Zeptomole(10-20) 高Zeptomole(10-19) 信号持续时间 6-8小时 8小时 24小时 首选检测方法 X胶片 成像设备或X胶片 成像设备或X胶片 建议抗体稀度 一抗：1/1,000-1/5,000 一抗：1/5,000-1/100,000 一抗：1/1,000-1/50,000 二抗：1/20,000-1/100,000 二抗：1/100,000-1/500,000 二抗：1/50,000-1/250,000 产品保存期 室温1年 4℃1年或室温6个月 室温1年 建议印迹膜 硝化纤维 硝化纤维或PVDF 硝化纤维或PVDF 曾用名 SuperSignal® WB化学发光底物 SuperSignal® BLAZE™ 化学发光底物 SuperSignal® ULTRA化学发光底物 &ze6xa#Jd _r
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SuperSignal west pico化学发光底物x${w9M L,h9pq{
·与ECL™ 系统相比价格减半
FD\*N?:{3\ c ·与ECL™ 系统相比信号加倍
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e+Ix*v'Xi3Po 更敏锐C7_'z dMuV
在相同的条件对比之下，在SuperSignal® West pico发光底物孵育下的印迹发光强度是ECL™ 系统孵育下的印迹的两倍多。50ng的鼠IL-2重组蛋白经连续稀释至0.003ng再经电泳分离后，转印到硝化纤维素膜上，封闭后与1ug/ml稀释度的大鼠抗小鼠IL-2抗体一起孵育。洗涤后，再加20ng/ml浓度的HRP标记的山羊抗大鼠孵育和第二次洗涤后，与按说明制备的底物孵育。经1和5分钟的曝光后，印迹就出现在胶片上。
!D7E+JJ&Ni)c x)SIG+f\

'fRd/e!~k 更便宜
(HxFvk)u.v SuperSignal® West pico化学发光底物的价格约为ECL™ system价格的一半左右。P}*msW1_%`8y;IV
  SuperSignal® West Pico底物 ECL™ WB检测底物  （目录号34080） （目录号RPN2106） 1999 U.S.价格/cm2 $0.03 $0.06 .cd[3DIM*{

,^ T,Ln$[*k/Xu 更持久/XE*C$~8T4e-Vc p5s
在超过6小时的信号持续时间之内，我们有足够的时间使曝光的条件最优化。在许多情况下无重复跑胶的必要。
#_s| {/N1`b 更稳定1K\'_\Im Z(x8b(?0k
SuperSignal® West pico底物工作溶液在稳定的室温条件下可存放12个月以上，其活性不会有明显的减弱。室温下稳定性不仅使人们节约了低温室的花费而且还节约了时间，因为不必再需平衡到室温了。"{xnn/dA)l#K
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SuperSignal® West Femto超灵敏型底物
+`9{ jfs]-zh ·拥有最高灵敏度的HRP化学发光底物Hfng$Hd8\Q(@7x
超灵敏度k6WO \c
SuperSignal® West Femto底物将无与伦比的信号强度与飞克甚至zeptomole级的最低化学发光检测极限相结合，是适用于任何场合的最灵敏的化学发光底物。LV,kzq;L"p
利用1/5,000稀释度的一抗和1/400,000稀释度的二抗制作的白细胞介素-2免疫印迹，最佳可测印迹低至61飞克。
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最便宜实惠%z@:_J]$AG:rq
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与ECL Plus™ 系统相比，SuperSignal® West Femto底物并不仅仅是灵敏度高，从长远来看它还更为经济实惠。以下表格是不同底物从开始到结束整个过程花费的比较情况。底物使用方法由厂商推荐，请注意抗体和膜成本的差异。
j.hY {[!_ SuperSignal® 与ECL™ 产品印迹花费对比：2?^-~5JE
X _,k];u
底物花费对比 SuperSignal® West Pico 底物 SuperSignal® West Dura 底物 SuperSignal® West Femo 底物 ECL™ 底物 ECL Plus® 底物 膜（10cm10cm） $5.00 $5.00 $5.00 $4.00 $4.00 TBS清洗缓冲液（250ml） $1.01 $1.01 $1.01 $1.01 $1.01 SuperBlock® 封闭缓冲液（40ml） $5.70 $5.70 $5.70 $5.70 $5.70 一抗（10ml） $2.40 $2.40 $0.49 $24.50 $24.50 二抗（10ml） $0.10 $0.03 $0.02 $1.42 $1.42 底物（10ml） $2.50 $23.00 $26.00 $5.30 $20.80 X胶片（CL-Xposure™ Film对Hyper™ Film） $0.60 $0.60 $0.60 $1.88 $1.88 总印迹花费 $17.31 $37.74 $38.32 $43.81 $59.31
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'\ @|\ l(w SuperSignalest® West Dura增强型底物
-PTq-V q)k^*J ·当今成像系统使用的最理想的底物选择
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随着Cooled-CCD技术的发展，成像系统成本越来越低，因而在现在的实验室里这些设备越来越普遍。为了满足使用这种有效的新技术进行研究的需求，Pierce开发了SuperSignal® West Dura增强型底物。Cooled-CCD照相机与X胶片相比具有瞬时影像处理、高灵敏度、高分辨率、动力学范围广等优点，而且还不需要胶片处理装置及暗室。然而，这项技术还有一个缺点，它要求底物能产生高强度长持续时间的信号，以被照相机捕获到。Pierce的SuperSignal® West Dura增强型底物满足了这种需求。它的持续24小时的超强信号，使研究者们能够充分利用成像系统的所有优点。'FT)]e1s|3B
灵敏度：_2EZ n~(v6z
虽然延长信号持续时间让研究者能充分利用成像系统的所有特点，但低极限的灵敏度才是研究者的终极目标，为了演示SuperSignal® West Dura底物优于ECL Plus? 的特点，，我们进行了相同条件下的平行实验。根据厂商推荐，仅以下不同：ECL Plus™ 系统转移到PVDF膜上，与此同时SuperSignal® West Dura底物被转移到硝化纤维素膜上。如图所示，30分钟曝光后，获得了清晰的SuperSignal® West Dura底物图象，而ECL Plus™ 系统由于其背景干扰太大而不能将条带分开，不得不在15min后就停止了。
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持续时间：|kJ:YxcF
下表举例说明了SuperSignal® West Dura底物超过24小时的信号持续时间以及用cooled-CCD照相机捕获的清晰信号。用Alpha Lnnotech Corporation chemilmage™ 4000摄取图像，和SuperSignal® West Dura底物孵育5分钟后，在不同的时段和经不同的时间曝光后，得到的37pgHRP点印迹影像。
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NnXa4KL+D,O tH1{2p4a.RB1j
  底物孵育时间 曝光时间 点印迹影像 5分钟 5分钟 30分钟 5分钟 1小时 5分钟 2小时 5分钟 3小时 5分钟 4小时 5分钟 5小时 5分钟 6小时 5分钟 7小时 5分钟 8小时 5分钟 24小时 30分钟 24小时 1小时
vs7HtH1L|%OlMY3W 目录号 产品说明 规格 价格（元） 34080 SuperSignal West Pico化学发光底物 500ml 2363 34079 SuperSignal West Pico化学发光底物检测试剂盒 50ml 493 34075 SuperSignal West Dura化学发光底物 100ml 4080 34071 SuperSignal West Dura化学发光底物检测试剂盒 20ml 935 34095 SuperSignal West Femto超灵敏型底物 100ml 4590 34094 SuperSignal West Femto超灵敏型检测试剂盒 20ml 1105
/m.HqGL%u zC8w)ji5F`g1O
化学发光ELISA试剂盒（高灵敏度）
!d*^ c} {H-f)E^ ORION化学发光分析仪

water 发表于 2007-6-5 09:59

kk

我要分析 发表于 2007-8-13 13:19

什么东西

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