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分析化学论坛's Archiver

onizuka 发表于 2007-7-25 21:07

实验室常用技术参数资料

[size=9pt][font=宋体][color=#000000][align=center][align=center][size=9pt]实验室常用技术参数资料[/size][size=9pt][/size][/align][/align][size=9pt]  一、核酸及蛋白质常用数据[/size][size=9pt][/size]WKE U,MW%hRh1Uh9L
[align=center][align=center][size=9pt]1[/size][size=9pt].核苷三磷酸的物理常数[/size][size=9pt][/size][/align][/align][align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]化合物[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]分子量[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]λmax(pH7.0)[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]1[/size][size=9pt]摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]OD280/OD260[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]ATP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]507[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]259[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]15400[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.15[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]CTP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]483[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]271[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]9000[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.97[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]GTP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]523[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]253[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]13700[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.66[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]UTP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]484[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]262[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]10000[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.38[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]dATP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]494[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]259[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]15200[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.15[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]dCTP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]467[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]271[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]9300[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.98[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]dGTP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]507[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]253[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]13700[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.66[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,80][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]dTTP[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]482[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,94][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]267[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,199][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]9600[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,99][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]0.71[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][align=center][align=center]2.常用核酸的长度与分子量[/align][/align][align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]核酸[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,32%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]核苷酸数[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]分子量[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]λDNA[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,32%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]48502[/size][size=9pt](双链环状)[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]3.0[/size][size=9pt]×107[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]pBR322[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,32%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]4363[/font][/size][font=宋体][size=9pt](双链)[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]8E5K7O3U)k3eX[
[/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]2.8[/size][size=9pt]×106[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]28SrRNA[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,32%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]4800[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
1ve"alRlI|] w!k [/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]1.6[/size][size=9pt]×106[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]23SrRNA[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,32%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]3700[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
}J1?/{SE3U&m [/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]1.2[/size][size=9pt]×106[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]18SrRNA[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,32%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]1900[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]7HW"y:\;Q2x-M%o
[/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]6.1[/size][size=9pt]×105[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]19SrRNA[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,32%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]1700[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
Zq9X9^$F"N%d.M5|6n [/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]5.5[/size][size=9pt]×105[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]5SrRNA[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,32%][font=Times New Roman][color=#000000][size=9pt]120[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color][/font]?8R y!eBva\&DT:d
[/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]3.6[/size][size=9pt]×104[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,35%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]tRNA[/size][size=9pt](大肠杆菌)[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,32%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]75[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]gmR8^X l"_e
[/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]2.5[/size][size=9pt]×104[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][align=center][align=center]3.常用核酸蛋白换算数据[/align][/align][size=9pt]  (1)重量换算[/size][size=9pt][/size]
^"C*QR,i [size=9pt]  1μg=10-6g      1pg=10-12g[/size]
3d!ZYcphC C [size=9pt]  1ng=10-9g      1fg=10-15g[/size]
2c+{0ZhTD5~ [size=9pt]  (2)分光光度换算:[/size][size=9pt][/size]
S(m,f(?\ [size=9pt]  1A260双链DNA=50μg/ml[/size]
N+L_Q tN4V(^X [size=9pt]  1A260单链DNA=30μg/ml[/size]1?y)cj)Q
[size=9pt]  1A260单链RNA=40μg/ml[/size]-fv0B_V~d*S
[size=9pt]  (3)DNA摩尔换算:[/size][size=9pt][/size]
#oBo5kw:A*C [size=9pt]  1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端[/size][size=9pt][/size]
$I(Y-j c2p/@4O [size=9pt]  1μg pBR322 DNA=0.36pmol[/size]
1?1X\_n?4NH [size=9pt]  1pmol 1000bp DNA=0.66μg[/size]
@_7A:V'uz l [size=9pt]  1pmol pBR322=2.8μg[/size]
9P%F7e Fc.eom3w0x [size=9pt]  1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿[/size][size=9pt][/size]
#EOj}bPgQ [size=9pt]  1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿[/size][size=9pt][/size]
&T\Am4K.h)BB^ [size=9pt]  1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿[/size][size=9pt][/size]'rC}e.ia'c |
[size=9pt]  (4)蛋白摩尔换算:[/size][size=9pt][/size]2l} f,p2p a
[size=9pt]  100pmol分子量100,000蛋白质=10μg[/size]
s^u3i+q9JeYd5h%QY [size=9pt]  100pmol分子量50,000蛋白质=5μg[/size]'R&\ X}S#\ ytIH2]'Z
[size=9pt]  100pmol分子量10,000蛋白质=1μg[/size]
FN:a^ nnH [size=9pt]  氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿[/size][size=9pt][/size]
#[5JZ6\!`En [size=9pt]  (5)蛋白质/DNA换算:[/size][size=9pt][/size]
ME h![|$Z [size=9pt]  1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质[/size][size=9pt][/size].A$WJgo|'h'i
[size=9pt]  10,000MW蛋白质=270bp DNA[/size]
)D#T-I.qR \g G [size=9pt]  30,000MW蛋白质=810bp DNA[/size]
.~JK ?/nX [size=9pt]  50,000MW蛋白质=1.35kb[/size]*q4l/dSxw+C z
[size=9pt]  100,000MW蛋白质=2.7kb DNA[/size]M _#J0[*m? v;f
[align=center][align=center]4.常用蛋白质分子量标准参照物[/align][/align][align=center][align=center][table=98%][tr][td=2,1,204][color=#000000][font=宋体][size=9pt]([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]1[/font][/size][font=宋体][size=9pt])高分子量标准参照[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
.fu"A!LU.yK7m8W [/td][td=2,1,204][color=#000000][font=宋体][size=9pt]([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]2[/font][/size][font=宋体][size=9pt])中分子量标准参照[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]{b(p)r m%`P
[/td][td=2,1,198][color=#000000][font=宋体][size=9pt]([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]3[/font][/size][font=宋体][size=9pt])低分子量标准参照[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
%Q6e1nTqHEj9E)K [/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt]肌球蛋白[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]8F2H%s#P]5D
[/td][td=1,1,73][color=#000000][font=宋体][size=9pt]分子量[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
sSeyQi9Q!r | U!b&P [/td][td=1,1,128][color=#000000][font=宋体][size=9pt]磷酸化酶[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]B[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]c/~~D {
[/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]97[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]400[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
JVob6n0EM%?N [/td][td=1,1,122][color=#000000][font=宋体][size=9pt]碳酸酐酶[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]4u|z1o(p&d'L4X hW
[/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]31[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]00[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
-z*`&uOW@$r$Z [/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt]肌球蛋白[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]U4N4f&_Kq
[/td][td=1,1,73][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]212[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]000[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color] g.ZR4x$DeW
[/td][td=1,1,128][color=#000000][font=宋体][size=9pt]牛血清白蛋白[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
9\ Ym9I;|&@'W6V [/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]66[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]200[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
)u^8AD4_^3\h [/td][td=1,1,122][color=#000000][font=宋体][size=9pt]大豆脻蛋白酶[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
8_-h VK*{ [/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]21[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]500[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]+B2N#N hI+`"Q
[/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt]β[/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]半乳糖甘酶[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]B[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
7Bn&|tfb)h-}-E [/td][td=1,1,73][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]116[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]000[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
zQ"[+@l.Ji [/td][td=1,1,128][color=#000000][font=宋体][size=9pt]谷氨酶脱氢酶[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]9G$d7]$?j? A+],r-d|/s
[/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]55[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]000[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
S_?K[%gL7f ` [/td][td=1,1,122][color=#000000][font=宋体][size=9pt]抑制剂[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
`WM/lx v(p X3X bQ [/td][td=1,1,58][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
GM.q)d H)}0L#B [/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt]磷酸化酶[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]B[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
CGt2c8]t/U [/td][td=1,1,73][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]97[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]400[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]?0v(QZ x:M*d&j$e7o
[/td][td=1,1,128][color=#000000][font=宋体][size=9pt]卵白蛋白[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
EgPV]d _q~d+E [/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]42[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]700[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]#r/d)tZ+mVr ^?^
[/td][td=1,1,122][color=#000000][font=宋体][size=9pt]马心肌球蛋白[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]-z#h(J5p'e[
[/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]16[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]900[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
LoN*z?4b!g#i [/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt]牛血清白蛋白[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
Huo4s O(V"cR,_ }z [/td][td=1,1,73][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]66[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]200[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
L yhX O/` [/td][td=1,1,128][color=#000000][font=宋体][size=9pt]醛缩酶[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
w\ Fif"gsA [/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]40[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]000[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
'b5_*O`,S#I i u7|;~ [/td][td=1,1,122][color=#000000][font=宋体][size=9pt]溶菌酶[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]4i:^+l-ca n!Uu
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[/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt]过氧化氢酶[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]`[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
p/Op#A2w9@R Fr [/td][td=1,1,73][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]57[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]000[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]*I~/VW*{5a4E{*u
[/td][td=1,1,128][color=#000000][font=宋体][size=9pt]碳酸酐酶[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
6L8f6OnGGCb [/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]31[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]000[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]#MV"k_:W%{R
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S t!v$a { [/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]6[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]200[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
Bu+BF4L*Hv^ [/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]:pP(efa6dI)C
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[/td][td=1,1,58][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]!^L*m2I ~b
[/td][td=1,1,122][color=#000000][font=宋体][size=9pt]肌球蛋白([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]F3[/font][/size][font=宋体][size=9pt])[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
z7{W5oy` [/td][td=1,1,58][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]2[/font][/size][font=宋体][size=9pt],[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]500[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
\'^k+c1Uk| [/td][/tr][tr][td=1,1,113][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
p+LT*k6Tn8o [/td][td=1,1,73][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
7CP'B,S'| [/td][td=1,1,128][color=#000000][font=宋体][size=9pt]溶菌酶[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]3h v7_*` A~$D*P%V"G/|
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&W{4j,O`0a&?/x;s3N [/td][td=1,1,122][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
/v5R.{deB [/td][td=1,1,58][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
JN#\ @4l(\%p?%c u [/td][/tr][/table][/align][/align][align=center][align=center]5.常用DNA分子量标准参照物[/align][/align][align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]λDNA/HindⅢ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]λDNA/EcoRⅠ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]λ/HindⅢ+EcoRⅠ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=2,1,30%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]pBR322/Hae[/size][size=9pt]Ⅲ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]23130[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]21226[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]21227[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]587[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]123[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]9416[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7421[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]5148[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]405[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]104[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6557[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]5804[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]4973[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]504[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]89[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]4361[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]5643[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]4268[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]458[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]80[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]2322[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]4843[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]3530[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]434[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]64[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]2027[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]3530[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]2027[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]267[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]57[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]564[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,20%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
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F,b1d{_`;G.z [/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1375[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]192[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]18[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
C Ay)pA u [/td][td=1,1,20%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]v rW:DO(U J9PT
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[/td][td=1,1,20%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]}'h#DGp M%d
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[/td][td=1,1,20%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
(U'k fp?:BNU.T [/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]125[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,15%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]Jw)ad4o'T
[/td][td=1,1,15%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color] P x eN\m
[/td][/tr][/table][/align][/align][align=center][align=center][size=9pt]续上表[/size][size=9pt][/size][/align][/align][align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]pBR322/Hinf[/size][size=9pt]Ⅰ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=2,1,29%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]φχ174/HinfⅠ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]φχ174/Hae Ⅲ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]φχ174/TapⅠ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1631[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]726[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]140[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1353[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]2914[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]517[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]713[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]118[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1078[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1175[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]506[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]553[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]100[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]872[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]404[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]396[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]500[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]82[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]603[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]327[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]344[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]417[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]66[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]310[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]231[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]298[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]413[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]48[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]281[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]141[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]221[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]311[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]42[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]271[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]87[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]220[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]249[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]40[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]234[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]54[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]154[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]200[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]24[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]194[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]33[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]75[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]151[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
#^jq U,P0M'F [/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]118[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]20[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,22%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
wz!QNV [/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]&H8]|.^)k2n
[/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
R%TLm2Z~ [/td][td=1,1,26%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]72[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,24%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
9t4[!aqO3m4Q(j [/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  二、常用缓冲液[/size][size=9pt][/size]
L;L s&fw,_;IRL [size=9pt]  1.分子克隆常用缓冲液[/size][size=9pt][/size]
's#e d+`$YFo R~Y [size=9pt]  2.磷酸缓冲液[/size][size=9pt][/size]
uq||C7_.L [size=9pt]  (1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※[/size][size=9pt][/size]8KuNN2V9L
[align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]pH[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1mol/L K2HPO4(ml)[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1mol/L KH2PO4(ml)[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]5.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]91.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]13.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]86.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]19.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]80.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]27.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]72.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]38.1[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]61.9[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]49.7[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]50.3[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]61.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]38.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]71.7[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]28.3[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]80.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]19.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]86.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]13.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]90.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]9.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]94.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  (2)25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※[/size][size=9pt][/size]|u0r#Jr3u#[+bS$T.qL
[align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]pH[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1mol/L Na2HPO4(ml)[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]1mol/L NaH2PO4(ml)[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]5.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.9[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]92.1[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]12.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]88.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]17.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]82.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]25.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]74.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]35.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]64.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]46.3[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]53.7[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]57.7[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]42.3[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]68.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]31.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]77.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]22.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]84.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]15.5[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]89.6[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]10.4[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]93.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.8[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  ※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml,根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值:[/size][size=9pt][/size]1M*]rsU
[size=9pt]  pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])[/size]
\&o ~ n"wKU [size=9pt]  在此,pK’=6.86(25℃)。[/size][size=9pt][/size]p@o~m3UpG
[size=9pt]  3.电泳缓冲液[/size][size=9pt][/size]
&M)`g.m5a8} O [size=9pt]  测序凝胶加样缓冲液[/size][size=9pt][/size]*_k/V ]U$@M6B%|m'J
[size=9pt]  98%去离子甲酰胺[/size][size=9pt][/size]
?B1J^6w/{/N [size=9pt]  10mol/L EDTA(pH8.0)[/size]
!xqz5G%pS,BKM [size=9pt]  0.025%二甲苯青FF[/size]
km#C0Q#\1I| ?+~#D [size=9pt]  0.025%溴酚蓝[/size][size=9pt][/size]
c'x?NcL [size=9pt]  甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,无须再进行处理。不过,一旦略呈黄色,则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理,并用Whatman 1号滤纸过滤2次,去离子甲酰胺分装成小份,充氮存于-70℃。[/size][size=9pt][/size]L:p R&Ym:gx
[align=center][align=center][size=9pt]常用的电泳缓冲液[/size][size=9pt][/size][/align][/align][align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,135][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]缓冲液[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,212][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]使用液[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,208][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]浓贮存液(每升)[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]Tris-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]乙酸([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]TAE[/font][/size][font=宋体][size=9pt])[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]+At X6Ru1o.Y7ZS
[/td][td=1,1,212][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]1×[/font][/size][font=宋体][size=9pt]:[/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]0.04mol/L Tris-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]乙酸[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]|\Wy6OQ9lops
[/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]50×[/font][/size][font=宋体][size=9pt]:[/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]242g Tris[/font][/size][font=宋体][size=9pt]碱[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]bt3i5R/X&X
[/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
-vP$g8W]x7vG [/td][td=1,1,212][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.001mol/L EDTA[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
$Cn!X+f+VK [/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]57.1ml[/font][/size][font=宋体][size=9pt]冰乙酸[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]l3V$NR.Cj0|pL
[/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
Vo YR;D [/td][td=1,1,212][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
Q s~c ^8_F+T [/td][td=1,1,208][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
Wj|$FM^f [/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]Tris-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]磷酸([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]TPE[/font][/size][font=宋体][size=9pt])[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]c4n'w5Q:Wg Rd
[/td][td=1,1,212][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]1×:0.09mol/L Tris-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]磷酸[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]Ky5Z pe q
[/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]10×:10g Tris[/font][/size][font=宋体][size=9pt]碱[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]Xc2]G1S k|0y.k
[/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]2M d#_UO5b9_'[
[/td][td=1,1,212][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.002mol/L EDTA[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
F*wB y"e2cA#|%} [/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]15.5ml85%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]磷酸([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]1.679g/ml[/font][/size][font=宋体][size=9pt])[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
%k#U#I0q ?v4~I [/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
7zU:\,D(O$iZ3V^f"{ [/td][td=1,1,212][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
#d'oe P1Gm [/td][td=1,1,208][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
4XY xuJ5x5j [/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]Tris-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]硼酸([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]TBE[/font][/size][font=宋体][size=9pt])[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]a[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color] n!bewX U)?4p9xJ
[/td][td=1,1,212][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.5×0.045mol/L Tris-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]硼酸[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
b3z B9Z8u1V$\p'K [/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]5×[/font][/size][font=宋体][size=9pt]:[/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]54g Tris[/font][/size][font=宋体][size=9pt]碱[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
D}y P mj+\c4g@(O,h [/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]i1x/M^:V1^
[/td][td=1,1,212][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.001mol/L EDTA[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
h9`4Br#T [/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]27.5[/font][/size][font=宋体][size=9pt]硼酸[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
v-U.?M(a [/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]q0x5]Y`f0I y6K
[/td][td=1,1,212][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]/AOG+[U!u6t
[/td][td=1,1,208][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
MH-}eKX-q5y` h [/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt]碱性缓冲液[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]b[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
F m!yv5[J [/td][td=1,1,212][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]1×:50mmol/L NaOH[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]f8K"zD%M
[/td][td=1,1,208][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]1×:5ml 10mol/L NaOH[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]&ejT%C Q1`.SY.r
[/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
.W-r-h0bw:y m [/td][td=1,1,212][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]1mmol/L EDTA[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
8z1f#{h5OqF'K [/td][td=1,1,208][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]c5so9X;y,ia
[/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]Tris-[/font][/size][font=宋体][size=9pt]甘氨酸[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]c[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
UQ5z4S b%Fc,F+w+n [/td][td=1,1,212][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]1×:25mmol/L Tris[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
waJ.z,eBc&b].] [/td][td=1,1,208][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]5×:15.1g Tris[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]k| yT7ba-RW
[/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
v }{unk3z&_ [/td][td=1,1,212][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]250mmol/L [/font][/size][font=宋体][size=9pt]甘氨酸[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]t!Gj"J L0L5C
[/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]94g [/font][/size][font=宋体][size=9pt]苷氨酸(电泳级)([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]pH8.3[/font][/size][font=宋体][size=9pt])[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]$K:N#SO4}Og&C
[/td][/tr][tr][td=1,1,135][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
N{.ju7@ _ r H [/td][td=1,1,212][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.1% SDS[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]8J$z;w(hCcIj
[/td][td=1,1,208][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]50ml 10% SDS([/font][/size][font=宋体][size=9pt]电泳级[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt])[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
#t?$nV!HW+BZp [/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  说明:[/size][size=9pt][/size]
3V$y$N~4R*X.V t,})a9] [size=9pt]  ①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液,出现沉淀后则予以废弃。[/size][size=9pt][/size]
"Q*mA^;Q9}9E,mx [size=9pt]  以片都以1×TBE作为使用液(即1:5稀释浓贮液)进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1:10稀释的贮存液作为使用液。[/size][size=9pt][/size]$j MML(G-`6TeCM
[size=9pt]  进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小, 故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。[/size][size=9pt][/size]
0x-V,LT#j9S [size=9pt]  ②碱性电泳缓冲液应现用现配。[/size][size=9pt][/size]l#w%O c Y O-R
[size=9pt]  ③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。[/size][size=9pt][/size])a0vzX[j
[size=9pt]  2×SDS凝胶加样缓冲液:[/size][size=9pt][/size]'s7sb6q\
[size=9pt]  100mmol/L Tris·HCl(6.8)[/size]
h)L8Wok,^ [size=9pt]  200mmol/L二硫苏糖醇(DTT)[/size][size=9pt][/size]
o&P0r!la [size=9pt]  4%SDS(电泳级)[/size][size=9pt][/size] H#G)Fk@t.`C2m y
[size=9pt]  0.2%溴酚蓝[/size][size=9pt][/size]S\1?JjuUy0GD2\*L
[size=9pt]  20%甘油[/size][size=9pt][/size]
#xr%uv PMm [size=9pt]  不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。[/size][size=9pt][/size]D:x;X? bC8@L!LK
[size=9pt]  4.凝胶加样缓冲液[/size][size=9pt][/size]
Z$huC:KD5F [align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]缓冲液类型[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,41%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]6[/size][size=9pt]×缓冲液[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]贮存温度[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,3,25%][align=center][align=center]
"zg@$q-H Hlj [color=#000000][font=宋体][size=9pt]Ⅰ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,41%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]溴酚蓝[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]6`P u(\)q
[/td][td=1,3,33%][align=center][align=center]
4?ur`3Y|:zL"w$z [color=#000000][font=宋体][size=9pt]4[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]二甲苯青[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]FF[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color].Yp8L"lU,v
[/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]40%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]W/V[/font][/size][font=宋体][size=9pt])蔗糖水溶液[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
"Cy Kk'P:?*^0XU [/td][/tr][tr][td=1,3,25%][align=center][align=center]
T0XZG^G [color=#000000][font=宋体][size=9pt]Ⅱ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,41%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25[/font][/size][font=宋体][size=9pt]溴酚蓝[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
N+_;t5Op1n'v j [/td][td=1,3,33%][align=center][align=center]
#KdmKb])n [color=#000000][font=宋体][size=9pt]室温[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]二甲苯青[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]FF[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]8N1j9z y-Pm[5e&V
[/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]15%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]聚蔗糖[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt](Ficoll400)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
ia3aOZZB~ [/td][/tr][tr][td=1,3,25%][align=center][align=center]!Z9~pYu.E$K Xc7j
[color=#000000][font=宋体][size=9pt]Ⅲ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,41%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]溴酚蓝[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
l,w-hg:bz~0ZMC7\A_ O [/td][td=1,3,33%][align=center][align=center]
N(jY*j#Gf [color=#000000][font=宋体][size=9pt]4[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]二甲苯青[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]FF[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
'g'K2o"xE [/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]30%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]甘油水溶液[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
L2P} Fs5A [/td][/tr][tr][td=1,2,25%][align=center][align=center]
!F O~ _1s7uV+m\x [color=#000000][font=宋体][size=9pt]Ⅳ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,41%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]溴酚蓝[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color],];@)HR/qJ
[/td][td=1,2,33%][align=center][align=center]w&zt)EG5Q/E
[color=#000000][font=宋体][size=9pt]4[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]40%(W/V)[/font][/size][font=宋体][size=9pt]蔗糖水溶液[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
&o0rvDE;b [/td][/tr][tr][td=1,3,25%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
OQ+en j7c"SY_r#n eY [/td][td=1,1,41%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]碱性加样缓冲液[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]:[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color] {3b;l L4}d5N6v
[/td][td=1,3,33%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]H+Ib7Y&X*ox
[/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]300mmol/L NaOH[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
'Db$b z$j)?-B [/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]6mmol/L EDTA[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color])CAesW}0IwW5i2~
[/td][/tr][tr][td=1,3,25%][align=center][align=center]JwPl9\ m*l rw&l
[color=#000000][font=宋体][size=9pt]Ⅴ[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,41%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]18%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]聚蔗糖[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt](Ficoll400)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
5Jbd d5L [/td][td=1,3,33%][align=center][align=center]
}C |'q4o [color=#000000][font=宋体][size=9pt]4[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.15%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]溴甲酚绿[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
X@4}v%g e.[? [/td][/tr][tr][td][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]0.25%[/font][/size][font=宋体][size=9pt]二甲苯青[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]FF[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
yBo\~O-V:K3jv [/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三:增大样品密度;以确保DNA均匀进入样品孔内;使样品呈现颜色,从而使加样操作更为便利,含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2.2倍,而与琼脂糖浓度无关。以0.5×TBF作电泳液时,溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。在琼脂糖浓度为0.5%~1.4%的范围内,这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。[/size][size=9pt][/size]~0\BZ;@1ZP
[size=9pt]  选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。但是,对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料,因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。[/size][size=9pt][/size]4]Kg j~0CM
[size=9pt]  5.各种pH值的Tris缓冲液的配制[/size][size=9pt][/size]-~!eD+|0n!t^2?
[align=center][align=center][table=98%][tr][td=2,1,565][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]各种pH值的Tris缓冲液的配制 [/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]所需[/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]pH[/font][/size][font=宋体][size=9pt]值([/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]25[/font][/size][font=宋体][size=9pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=9pt])[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]0.1mol/L HCl[/size][size=9pt]的体积[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].1[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]45[/size][size=9pt].7[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]44[/size][size=9pt].7[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]43[/size][size=9pt].4[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].4[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]42[/size][size=9pt].0[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]40[/size][size=9pt].3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].6[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]38[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].7[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]36[/size][size=9pt].6[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].8[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]34[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].9[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]32[/size][size=9pt].0[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].0[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]29[/size][size=9pt].2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.1[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]26.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]8.2[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]22.9[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]8.3[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]19.9[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]8.4[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]17.2[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]8.5[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]14.7[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]8.6[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]12.4[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]8.7[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]10.3[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][font=Times New Roman][color=#000000][size=9pt]8.8[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color][/font][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][font=Times New Roman][color=#000000][size=9pt]8.5[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color][/font][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,181][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.9[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,384][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.0[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积(单位:ml)的0.1ml/L HCl混合,加水将体积调至100ml[/size]
d&UQ,df'e+GQ_ [size=9pt]  (2)温度对50mmol/L Tris·HCl液pH值的影响[/size][size=9pt][/size]
's&W%Xs.^2T [align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]4[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]25[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]37[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].1[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].6[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].7[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].4[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].4[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].8[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].9[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].6[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].6[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].0[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].7[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].7[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].1[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].8[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].8[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7[/size][size=9pt].9[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].9[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].0[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]9[/size][size=9pt].0[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].4[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].1[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]9[/size][size=9pt].1[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]9[/size][size=9pt].2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].6[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]9[/size][size=9pt].3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].7[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].4[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,178][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]9[/size][size=9pt].4[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,177][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].8[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,34][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]8[/size][size=9pt].5[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  (6)常用缓冲液的pKa值[/size][size=9pt][/size]
$Px,b4m.K [align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]缓冲液[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]分子量[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]pKa[/size][size=9pt]值[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]缓冲范围[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]Trisa[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]12.1[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.08[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7.1[/size][size=9pt]~7.9[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]HEPESb[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]283.3[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.47[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7.2[/size][size=9pt]~8.2[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]MPOSc[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]209.3[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.15[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]6.6[/size][size=9pt]~7.8[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]PIPESd[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]304.3[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.76[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]6.2[/size][size=9pt]~7.3[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]MESe[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]195.2[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.09[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,25%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]5.4[/size][size=9pt]~6.8[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  a:三羟甲基氨基甲烷;b:N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磷酸;c:3-(N-吗啉代)丙磺酸;d:N,N’-双(2-乙磺酸)哌嗪;e:2-(N-吗啉代)乙磺酸。[/size][size=9pt][/size]
m9f+uG,G [size=9pt]  7.温度对常用缓冲液pH的影响[/size][size=9pt][/size]9o9j ['Gl!CO
[align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]缓冲体系[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]pKa(20[/size][size=9pt]℃)[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]△pKa/10℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Mes[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.15[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.110[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Ada[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.60[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.110[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]PiPes[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.80[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.085[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Aces[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]6.90[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.200[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Bes[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.15[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.160[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Mops[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.20[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.013[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Tes[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.50[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.200[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Hepes[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]7.55[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.014[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Tricine[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.15[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.210[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Tris[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.30[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.310[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Bicine[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.35[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.180[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]Glycylglycine[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]8.40[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,33%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]-0.280[/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  三、常用酶的配制[/size][size=9pt][/size]~ V8s7lY)i"B
[size=9pt]  1.溶菌酶[/size][size=9pt][/size]-X6|"h5A1q$r"WP
[size=9pt]  用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液,分装成小份并保存于-20℃。每一小份一经使用后便予丢弃。[/size][size=9pt][/size]{} C~ A^dbA hf
[size=9pt]  2.蛋白水解酶类[/size][size=9pt][/size]gp4Z(a_4qF.X+Q
[align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,11%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]&~ Nwg5x!jN*Y?9a
[/td][td=1,1,13%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]贮存液[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
T"Q8W7iIp'P3p.B [/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]贮存温度[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]-C]3k`p d FWR%G
[/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]反应浓度[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]3hj8I%N~RlZx^%c`
[/td][td=1,1,22%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]反应缓冲液[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
QFQ&M8l @NJ [/td][td=1,1,11%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]温度[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
Kh~ X E v2P*@ [/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]预处理[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]lI AAe(G2F
[/td][/tr][tr][td=4,1,52%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
P:D-O'V2VGO [/td][td=1,1,22%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.01mol/L Tris(pH7.8)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
-q-V1P,W+M tbsy [/td][td=2,1,25%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
Nz,h Dh&s%y,~ [/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]链霉蛋白酶[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]a[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
YP)ea-R-^kT [/td][td=1,1,13%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]20mg/ml[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
.C]dUI/kw8i [/td][td=1,1,14%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]-20[/font][/size][font=宋体][size=9pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=9pt](溶于水)[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color])OJ'IM Ef/W
[/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]1mg/ml[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
D$X U3QT4L O [/td][td=1,1,22%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.01mol/L EDTA[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
ys6pB ]l!A9m`;C [/td][td=1,1,11%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]37[/font][/size][font=宋体][size=9pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]/G:@m}0xc
[/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]自消化[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]b[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
5?&nb_&t0z [/td][/tr][tr][td=4,1,52%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]/c!N Md"gR
[/td][td=1,1,22%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.5% SDS[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]@ _,g8A7E~#~1x h
[/td][td=2,1,25%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
B ` _ZR [/td][/tr][tr][td=4,1,52%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]V.\.W~:FBP'~
[/td][td=1,1,22%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.01mol/L Tris(pH7.8)[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
%@CyY0hSJ ]J O[ [/td][td=2,1,25%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
j!~w4~ q [/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]蛋白酶[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]Kc[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
5I7P^!V'Y0o'y [/td][td=1,1,13%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]20mg/ml[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
HQi,|9pLHTEx M [/td][td=1,1,14%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]-20[/font][/size][font=宋体][size=9pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=9pt](溶于水)[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
np%|g~ [/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]50μg/ml[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]!`}t{E[^
[/td][td=1,1,22%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.005mol/L EDTA[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]lYK&|0@"\.a
[/td][td=1,1,11%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]37[/font][/size][font=宋体][size=9pt]~[/size][/font][size=9pt][font=Times New Roman]56[/font][/size][font=宋体][size=9pt]℃[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
v*[5F1Y}"A0vE3wl^ a [/td][td=1,1,14%][color=#000000][font=宋体][size=9pt]无须预处理[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]8T&uT Ik`+DX
[/td][/tr][tr][td=4,1,52%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]?#Az"O}*IW:n
[/td][td=1,1,22%][color=#000000][font=Times New Roman][size=9pt]0.5% SDS[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
]#`#^APs)z*Bi [/td][td=2,1,25%][color=#000000][font=宋体][size=9pt] [/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
6QXN4pps5N:? [/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  a:链霉蛋白酶是从链球菌(Streptomyces griseus)中分离到的一种丝氨酸酶和酸性蛋白酶的混合物。[/size][size=9pt][/size]7|#j[,A s*{ Yu
[size=9pt]  b:自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染,经自消化的链酶蛋白酶的配制方法如下:把该酶的粉末溶解于10mmol./l Tris·HCl(pH7.5)、10mmol/l NaCl中,配成20mg/ml浓度,于37℃温育1h。经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中,保存-20℃。[/size][size=9pt][/size]
xY:Q6CO5O7i\ [size=9pt]  c:蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,从林伯氏白色念球菌(Tritirachium album Limber)中纯化得到。该酶有两个Ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去Ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶K消化过程中通常加入EDTA(以抑制依赖于Mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶K具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l Ca2+而不含EDTA的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGT(pH8.0)至终浓度为2mmol/L,以鳌合Ca2+。[/size][size=9pt][/size]8q]Uv4xSP?8a
[size=9pt]  3.无DNA酶的RNA酶[/size][size=9pt][/size]
BuA$DM-UP)W C [size=9pt]  将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/l Tris·HCl(pH7.5)、15mmol/l NaCl中,配成10mg/ml的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃。[/size][size=9pt][/size]
c3Q;kMNY [size=9pt]  四、常用抗生素溶液[/size][size=9pt][/size]8GY*cVP
[align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,2,17%][align=center][align=center]
Y5aY,R-O ~ [color=#000000][font=宋体][size=9pt]抗生素[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=2,1,43%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]贮存液a[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=2,1,40%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]工作浓度[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,26%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]浓度[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,17%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]保存条件[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][font=宋体][color=#000000][size=9pt]严紧型质粒[/size][size=9pt][/size][/color][/font][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][font=宋体][color=#000000][size=9pt]松弛型质粒[/size][size=9pt][/size][/color][/font][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]氨苄青霉素[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
9C` e8SzD#^*CC!M [/td][td=1,1,26%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]50mg/ml([/font][/size][font=宋体][size=9pt]溶于水[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt])[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
2\1Fxr,MabI%F V [/td][td=1,1,17%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]-20[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]20[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]60[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]羧苄青霉素[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]j/G6lI}
[/td][td=1,1,26%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]50mg/ml([/font][/size][font=宋体][size=9pt]溶于水[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt])[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
I7| j K*Q5h^ [/td][td=1,1,17%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]-20[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]20[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]60[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]氯霉素[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]W pX"v Z:MQM;O
[/td][td=1,1,26%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]34mg/ml([/font][/size][font=宋体][size=9pt]溶于乙醇[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt])[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
Knxa c b(]-l [/td][td=1,1,17%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]-20[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]25[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][font=宋体][color=#000000][size=9pt]170[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/color][/font][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]卡那霉素[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color]
$b'?.I:oq(}Q?S*DD [/td][td=1,1,26%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]10mg/ml([/font][/size][font=宋体][size=9pt]溶于水[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt])[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color] _ l9B GP ^5J'y%A
[/td][td=1,1,17%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]-20[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]10[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]50[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]链霉素[/size][/font][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/color][NLn4| @ zF
[/td][td=1,1,26%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]10mg/ml([/font][/size][font=宋体][size=9pt]溶于水[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt])[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
+u"Ti1q+F oD!H [/td][td=1,1,17%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]-20[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]10[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]50[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td][color=#000000][font=宋体][size=9pt]四环素[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt]b[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color] D9N9o+q1BZ,dK
[/td][td=1,1,26%][color=#000000][size=9pt][font=Times New Roman]5mg/ml([/font][/size][font=宋体][size=9pt]溶于乙醇[/size][/font][font=Times New Roman][size=9pt])[/size][font=宋体][size=9pt][/size][/font][/font][/color]
B7^(j"F]?Tj [/td][td=1,1,17%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]-20[/size][size=9pt]℃[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]10[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]50[/size][size=9pt]μg/ml[/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  a:以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。[/size][size=9pt][/size]wgBW.F~j
[size=9pt]  b:镁离子是四环素的拮抗剂,四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基(如LB培养基)。[/size][size=9pt][/size]
b(F.r@(s4{co2V [size=9pt]  五、常用贮存液的配制[/size][size=9pt][/size]
x:} e%xX.zX ht [size=9pt]  1.30%丙烯酰胺溶液[/size][size=9pt][/size](xt#p#SUY6A'y
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]/z}0U-_4I%F|GI,O?
[size=9pt]  将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。[/size][size=9pt][/size]
BAk Y-g.VH"zS [size=9pt]  【注意】[/size][size=9pt][/size]
bQNGJ [size=9pt]  丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。[/size][size=9pt][/size]Gu~.Qi
[size=9pt]  一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。[/size][size=9pt][/size]
XZT3P;dZ;CJ#G7w [size=9pt]  在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。[/size][size=9pt][/size]S6xQ&f%bkS|
[size=9pt]  2.40%丙烯酰胺[/size][size=9pt][/size] d rPi E(R6h)r
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
4w+MiJ |L,\F [size=9pt]  把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。[/size][size=9pt][/size]r PMTE
[size=9pt]  【注意】[/size][size=9pt][/size]
z.M-c;cLH [size=9pt]  见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。[/size][size=9pt][/size]K*z-f:~fedg
[size=9pt]  3.放线菌素D溶液[/size][size=9pt][/size]B3R z;Wp5h
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]s4BO SW
[size=9pt]  把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。[/size][size=9pt][/size]
7k+g)HLsmW;M@ ? [size=9pt]  【注意】[/size][size=9pt][/size]iZ:`&pfb2t6y
[size=9pt]  放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。[/size][size=9pt][/size]
&R8_-?ae~&I$^:Y [size=9pt]  药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。[/size][size=9pt][/size]#O:x-z0S"?%d)bg
[size=9pt]  4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液[/size][size=9pt][/size]
CEV cWL%g-M [size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
9@6W`4c'k\B S [size=9pt]  在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃[/size][size=9pt][/size]/\;W^ }gOJ
[size=9pt]  5.10mol/L乙酸酰溶液[/size][size=9pt][/size]8E msJk
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
w5n/J%uIz1\ [size=9pt]  把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。[/size][size=9pt][/size]
2Z2Z_`OERV [size=9pt]  6.10%过硫酸铵溶液[/size][size=9pt][/size]#e*w'Vni@8T {W
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
9d;^|'MA3g ] [size=9pt]  把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。[/size][size=9pt][/size]b|+];C_8fJl
[size=9pt]  7.BCIP溶液[/size][size=9pt][/size]Rr1tf+g5jd~p
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
1R;Ta[O6j G [size=9pt]  把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃[/size][size=9pt][/size]*bCU sxh
[size=9pt]  8.2×BES缓冲盐溶液[/size][size=9pt][/size]\ah Eo I.e&c\.P
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
c ~G [X-`LnFu [size=9pt]  用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。[/size][size=9pt][/size]
mqKH'S [size=9pt]  9.1mol/L CaCl2溶液[/size][size=9pt][/size]
o.reN} ~x [size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
o'M$wM4x#n4LN_5H [size=9pt]  在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2·6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。[/size][size=9pt][/size]5}c,{I#nE)g.W
[size=9pt]  【注意】[/size][size=9pt][/size]
@FH#n-syZ5we [size=9pt]  制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃。[/size][size=9pt][/size]/q6d t;V LQ[b@ ? {
[size=9pt]  10.2.5mol/L CaCl2溶液[/size][size=9pt][/size]'S8ZF S:Wo c,KDh
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]8_?h/`%P
[size=9pt]  在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2·6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。[/size][size=9pt][/size]
T+D#y x,K anN [size=9pt]  11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液[/size][size=9pt][/size] ~;f#u7U+Z"qK
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]2~S{CG h$H
[size=9pt]  用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。[/size][size=9pt][/size]
?#?A8J2M eHD:qe!] [size=9pt]  【注意】[/size][size=9pt][/size]*f~@psuR
[size=9pt]  DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。[/size][size=9pt][/size]Jr-}6y;i ix`!Y3c.D
[size=9pt]  12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液[/size][size=9pt][/size] x;N)`5fB(xz3Pc7q
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size](v1{;QE3`.k0Q
[size=9pt]  把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。[/size][size=9pt][/size]uSoi7`m4SOH&h3[
[align=center][align=center][table=98%][tr][td=1,1,27%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]碱基[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]波长(nm)[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][td=1,1,43%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]消化系数(ε)[L/(mol·cm)][/font][/color][/size][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,27%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]A[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]259[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,43%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]1.54[/size][size=9pt]×104[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,27%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]G[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]253[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,43%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]1.37[/size][size=9pt]×104[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,27%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]C[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]271[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,43%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]9.10[/size][size=9pt]×103[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,27%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]T[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,30%][align=center][align=center][size=9pt][color=#000000][font=宋体]260[/font][/color][/size][/align][/align][/td][td=1,1,43%][align=center][align=center][color=#000000][font=宋体][size=9pt]7.40[/size][size=9pt]×103[/size][size=9pt][/size][/font][/color][/align][/align][/td][/tr][/table][/align][/align][size=9pt]  比色杯光径为1cm时,吸光度=εM[/size]'?4R7J?7Xd ~)D/U
[size=9pt]  13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液[/size][size=9pt][/size]Rk%O Yu(z
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
f-K YU&d T [size=9pt]  在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na·2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节 溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。[/size][size=9pt][/size]
wgp/K h*EnY0E [size=9pt]  【注意】[/size][size=9pt][/size]
-f%ci1t4w Z*Lc [size=9pt]  EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。[/size][size=9pt][/size]
r%GS,U Q"j [size=9pt]  14.溴化乙锭(10mg/ml溶液)[/size][size=9pt][/size]u$`?t7p{
[size=9pt]  【配制方法】[/size][size=9pt][/size]
T(@Ki'p3x [size=9pt]  在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温。[/size][size=9pt][/size]
%f])l{\*b{E4S [size=9pt]  【注意】[/size][size=9pt][/size]
7l{ nx@H [size=9pt]  小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。[/size][size=9pt][/size]
4i&y z}k9@2q [size=9pt]  15.2×HEPES缓冲盐溶液[/size][size=9pt][/size]
qCKb:? R i [size=9pt]  【配制方法】[/si